Elabscience丙二醛(MDA)比色法測(cè)試盒(測(cè)細(xì)胞)適用于檢測(cè)細(xì)胞樣本中的丙二醛含量。
過(guò)氧化脂質(zhì)降解產(chǎn)物中的丙二醛(MDA)在高溫及酸性環(huán)境下可與硫代ba比妥酸(TBA)反應(yīng)產(chǎn)生紅棕色產(chǎn)物 3,5,5’-三甲基惡唑 2,4-er酮(三甲川),該物質(zhì)在 532 nm 處有最大吸收峰。
試劑準(zhǔn)備
① 檢測(cè)前,試劑盒中的試劑平衡至室溫。
② 試劑一2-8℃存放時(shí)會(huì)凝固,使用前37℃加熱,直到透明液體方可使用。
③ 試劑三若有析出,需在80℃加熱溶解,冷卻后使用。
④ 試劑二應(yīng)用液的配制:
按試劑二:雙蒸水= 1.2:34的比例進(jìn)行配制,2-8°C保存3個(gè)月。
⑤ 工作液的配制:
按試劑一:試劑二應(yīng)用液:試劑三= 0.2:3:1的比例進(jìn)行配制,現(xiàn)配現(xiàn)用。
實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵點(diǎn)
① 水浴反應(yīng) 40 min 時(shí)溫度要控制在 95-100°C。
② 吸取上清液到酶標(biāo)板時(shí),防止產(chǎn)生氣泡。
③ 試劑三中若有析出,需 80℃水浴加熱溶解后使用。
操作步驟
① 空白管:取 0.1 mL 無(wú)水乙醇,加入到 1.5 mL EP 管中。
標(biāo)準(zhǔn)管:取 0.1 mL 10 nmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)品,加入到對(duì)應(yīng)的 1.5 mL EP 管中。
樣本管:取 0.1 mL 待測(cè)樣本,加入到 1.5 mL EP 管中。
② 向①中各管加入 1 mL 工作液。
③ EP 管口用保鮮膜扎緊,充分混勻,并在保鮮膜上扎一個(gè)小孔,100°C水浴 40 min。
④ 流水冷卻至室溫,1078×g 離心 10 min。
⑤ 用微量移液器取上清液 0.25 mL 到酶標(biāo)板。(不能將沉淀加入酶標(biāo)板中)。
⑥ 酶標(biāo)儀上測(cè)定 532 nm 處的 OD 值。
注:如果不用保鮮膜,可先用注射器針頭在 EP 管蓋上扎一個(gè)小孔,防止水浴時(shí),管蓋崩開(kāi)。
產(chǎn)品選購(gòu):
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
E-BC-K028-M | 丙二醛(MDA)比色法測(cè)試盒(測(cè)細(xì)胞) | 48T(44 samples) |
96T(92 samples) |