Elabscience MS-小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒用于體外定量檢測小鼠血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中IL-10濃度。MS為Mini Sample的縮寫。MS系列試劑盒的上樣量僅為傳統(tǒng)夾心法ELISA試劑盒的1/4,能有效解決實驗樣本體積不夠的問題。Elabscience®自主開發(fā)的新技術(shù),旨在幫助您以更高效的方式進行科學研究。那么你知道Elabscience MS-小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒該怎么用嗎?讓我們一起來看看吧!
使用方法:
1. 分別設定標準孔、空白孔和樣本孔。標準孔加入25 μL倍比稀釋的標準品, 空白孔加入25 μL 標準品&樣本稀釋液,其余孔加入25 μL待測樣本(建議所有的待檢樣本和標準品在檢測中設立復孔;建議通過預實驗或咨詢技術(shù)支持確定待檢樣本的稀釋倍數(shù))。給酶標板覆膜,37℃孵育90分鐘。
提示:加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,避免產(chǎn)生氣泡。加樣時間宜控制在10分鐘內(nèi)。
2. 甩盡孔內(nèi)液體,不用洗滌。每個孔中加入生物素化抗體工作液50 μL,酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3. 甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干。每孔加洗滌液350 μL,浸泡1分鐘,吸去或甩掉酶標板內(nèi)的液體,拍干。重復此洗板步驟 3 次。
提示:此處與其他洗板步驟都可使用洗板機。洗板完成后請立即進行下步操作,不要讓微孔板干燥。
4. 每孔加HRP 酶結(jié)合物工作液50 μL,酶標板加上覆膜,37℃溫育30分鐘。
5. 甩盡孔內(nèi)液體,洗板5次,方法同步驟 3。
6. 每孔加底物溶液(TMB) 50 μL,酶標板加上覆膜,37℃避光孵育15分鐘左右。提示:根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當標準孔出現(xiàn)明顯梯度時(前4個顯色孔出現(xiàn)明顯藍色梯度),即可終止。提前15分鐘打開酶標儀預熱。
7. 每孔加終止液25 μL,終止反應。
提示:終止液的加入順序應盡量與底物溶液的加入順序相同。
8. 立即用酶標儀在450 nm 波長測量各孔的光密度(OD 值)。
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