基于對(duì)腫瘤生物標(biāo)志物特定分析的qPCR和RT-qPCR技術(shù)具有較高靈敏度,目前被廣泛用于液體活檢CTC 和ctDNA的鑒定。相對(duì)于基因測(cè)序來說,PCR技術(shù)更快速、易操作、成本低。然而CTC和ctDNA的分離通常需要新鮮血液樣品或其他能夠立即處理的樣品,并要求短時(shí)間內(nèi)對(duì)其分析,這在某種程度上限制了應(yīng)用。
邁迪安公司推出的抗抑性qPCR預(yù)混液(MDX013)是開發(fā)檢測(cè)CTC和ctDNA的液體活檢產(chǎn)品的理想選擇。這兩種預(yù)混液可以從血液、尿液或唾液等樣本中直接擴(kuò)增目標(biāo)DNA或RNA。在有抑制劑存在的情況下,使用這兩種抗抑性產(chǎn)品可以提高qPCR效率,便于開發(fā)出更簡(jiǎn)單、快速、靈敏的癌癥生物標(biāo)志物檢測(cè)產(chǎn)品。
通過對(duì)含有多種已知PCR抑制劑的樣本,如全血和生物 液體以及粗組織裂解液中擴(kuò)增,每反應(yīng)中添加20%樣本,測(cè)定PCR反應(yīng)效率。 結(jié)果表明,在有多種PCR抑制劑存在時(shí),抗抑性qPCR預(yù)混液的反應(yīng)效率保持在90-110%之間。
對(duì)不同液體樣本類型(尿液,牛奶和脊髓液)的有效擴(kuò)增
將基因組DNA連續(xù)稀釋10倍后加入腦脊液、人尿或牛奶中,使用抗抑性qPCR 預(yù)混液(綠色)和KAPA Probe Force 預(yù)混液(紅色)DNA擴(kuò)增。
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